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Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測(cè)試劑盒的原理與注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2023-12-25點(diǎn)擊次數(shù):1295

Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測(cè)試劑盒是一款靈敏度高且能快速簡便地檢測(cè)細(xì)胞凋亡的產(chǎn)品。本試劑盒可通過流式細(xì)胞儀來進(jìn)行懸浮細(xì)胞、貼壁細(xì)胞的流式凋亡檢測(cè)。那么你知道Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測(cè)試劑盒的原理與注意事項(xiàng)是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、檢測(cè)原理

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些特異性的DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。使得凋亡細(xì)胞的DNA被切割成180~200bp片段,在瓊脂糖凝膠上通常以180~200bp 的階梯狀遷移。細(xì)胞經(jīng)過固定破膜后,TdT酶(脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶)將熒光標(biāo)記的dUTP 連接到細(xì)胞斷裂DNA 暴露的 3'-OH 末端,通過流式細(xì)胞儀檢測(cè) dUTP偶聯(lián)物發(fā)出的熒光信號(hào),從而來檢測(cè)晚期凋亡。

二、保存條件

-20°C 保存,保質(zhì)期一年。Labeling Solution 需避光保存,Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer需避免反復(fù)多次凍融,建議分裝保存。

三、注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用。

2. 請(qǐng)注意安全事項(xiàng),遵守實(shí)驗(yàn)室試劑操作規(guī)范操作。

3. 用于該試劑盒的檢測(cè)樣本zui低細(xì)胞數(shù)目不低于 5×105個(gè)。

4. 實(shí)驗(yàn)中需要重懸細(xì)胞的步驟,用移液器輕輕吹打細(xì)胞 10~20次,吹打時(shí)請(qǐng)勿將槍頭中的液體wan全吹出,避免造成細(xì)胞損傷和產(chǎn)生過多的氣泡。

5. 離心去上清的操作要小心謹(jǐn)慎,避免造成細(xì)胞損失。

6. Labeling Solution和TdT Enzyme 應(yīng)避免反復(fù)凍融和渦旋操作。

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